Aklimatyzacja kalusa w ex vitro

[ERNRUD]

Boję się, że może temat zbyt naukowy, ale chciałbym się spytać czy ktoś z Was może ma jakieś doświadczenie z tego rodzaju pracami laboratoryjnymi. Chodzi mi o możliwość wykorzystania sztucznie namnożonej tkanki przyrannej w regeneracji uszkodzeń drzew. Na ile jest to realne.

[damek1718]

Co to znaczy sztucznie? i jak w regeneracji? Jak to wyobrażasz sobie?

Kalus (amorficzna masa komórek) jest to tkanka, którą możemy uzyskać w kulturze in vitro z różnych części rośliny. Nawet za jego pośrednictwem jesteśmy w stanie uzyskać droga somatycznej embriogenezy zarodki somatyczne. Z nich podobnie jak z samego kalusa w obecności hormonów egzogennych możemy zregenerować nowe całe rośliny. Jednak obecnie przynajmniej w ex vitro nie można przeszczepić tkanki kalusowej na zranione tkanki z nadzieja na zrośnięcie się jej. Roślina sama w sobie ma taką zdolność i powstająca rana zabliźniająca (kalus) musi nastąpić z komórek różnicujących się. W momencie powstania kalusa, tworzy się kambium a tego łyko i drewno, które przyrastają na długość i grubość powodując zanik tkani przyrannej. Komórki kalusa muszą być połączone integralne z innymi komórkami, które powodowałyby ten przyrost.

[ERNRUD]

No właśnie o to mi chodzi. O przypadki cennych egzemplarzy z poważnymi ranami, które nie wykazują wysokiej zdolności do kalusowania, np. stare wyschnięte rany. Więc czemu jeszcze czegoś takiego nigdy nie zastosowano? Problemy z aklimatyzacją w ex vitro i cena jak się domyślam? Rozwijam temat, bo przyśnił mi się taki kalus w pudełku dla amatorów.

[damek1718]

Bo kalus jest tylko zespołem komórek aktywnych, a nie jest systemem zdolnym do funkcjonowania w środowisku zewnętrznym. Podam ci na przykładzie człowieka. Można przeszczepić skórę człowiekowi i ona połączy się organizmem. Jednakże musi ona być połączona tak, aby nerwy, naczynia krwionośne łączyły się inaczej obumrze. Podobnie jest z kalusem, jeśli komórki kalusa nie połaczy sie z komórkami tkanki organizmu to nie będą wykazywać swoich właściwości. Jest to zwyczajnie niewykonalne. W dzisiejszych czasach cenne odmiany albo rozmnaża się w kulturach, a następnie mrozi w ultra niskiej temperaturze tworząc bank genów, bądź tez na mniejszą skalę rozmnaża wegetatywnie i tworzy kolekcje ex situ takich roślin.

[ERNRUD]

No więc jakby taki kalus z in vitro połączył z tkanką przyranną na rosnącym drzewie to istniałaby możliwość osiągnięcia sukcesu?

[damek1718]

Nie

[mirzan]

Zaschniętą ranę na gałęzi,skaleczyć na nowo,owinąć szczelnie izolacją, a kallus wytworzy się pod opatrunkiem. Być może zarośnie całą ranę.
Bawiąc się w ukorzenianie gałązek,spotkałem ciekawe zjawisko. Przy górnym cięciu sadzonki,
wytworzył się kallus. Nic nowego,normalka,w dużej wilgotności,pod przykryciem. Na kilku gałązkach,kallus ma chlorofil. Nie cała masa,mniej więcej połowa.Odcinkami,biały,zielony,biały zielony.Nie pamiętam,czy coś zmajstrowałem,czyli czy posmarowałem lub opryskałem jakimś
hormonem. na razie obserwuję,co będzie dalej. Biały kallus na wierzchu,z czasem zanika,może ten zielony wytworzy pędy czy korzenie.

[damek1718]

mirzan, ale nie o taka formę kalusa chodziło. ERNURD pytał sie o kalus wyhodowany in vitro. Wiadomo podczas ukorzeniania czy rany kalusowanie jest normalnym zjawiskiem, ale zawsze zachodzi podczas aktywności komórek w tkankach.

[ERNRUD]

No z tą izolacją to też chyba ryzyko. Jaką mamy pewność, że w środku nie pojawi się wilgoć, a wtedy patogeny będą hulać.? Zawsze uczy się, żeby trzymać ranę "czysto i sucho", a więc z dobrym oblotem powietrza. Chociaż kto wie... można kiedyś spróbować na jakimś mniej znaczącym drzewie. A czym radziłbyś owinąć?

[mirzan]

Owiń tak jak przy szczepieniu.Nikt nie zakłada klimatyzacji pod zawinięte miejsce szczepienia.
Kallus można przenieść na pożywkę w laboratorium.
Czy ktoś spotkał się z zielonym kallusem?

[damek1718]

Kalus może być trochę zielony, ale tylko na organach żywych fotosyntetyzujących i w zależności od rodzaju tkanki. W kulturze in vitro raczej tylko biały.
Nie wiem w końcu co tak naprawdę chcecie uzyskać Kalus na drzewie?, kalus na sadzonkach zdrewniałych, półzdrewniałych? Obserwacja tworzenia sie tkanki przyrannej ? jeśli tak to zaszczep zraza na podkładce i będziesz miał widoczne zrośnięcie i kalus. Kalus w kulturze in vitro ma zupełnie inną konsystencje niż kalus na organach żywych. Jak ukorzeniasz sadzonkę to tez tworzy sie kalus a następnie morfogeneza i tworzenie się korzeni. Tak jak na zdjęciu:

Kalus, który wytworzył się na pedzie i z niego tworzą sie korzenie. Kalus wytworzył się w tym wypadku w odpowiednich warunkach i z komórek aktywnych morfogenetycznie.

Tutaj natomiast widoczny kalus w kulturze in vitro . Typowa struktura gruzełkowata, biały i widoczne wytworzone wieloroślinki.

Teraz sobie sami odpowiedzcie na pytanie czy zarówno w jednym jak i w drugim przypadku jest możliwość pobrania kalusa i przeszczepienia go do rośliny i czy to ma sens ???

[mirzan]

W moim przypadku,kallus na górnej części pędu zdrewniałego,powstał nieplanowo.
U dołu też już się wytworzył,ale korzeni jeszcze nie ma.Ciekawy jestem,czy to normalne
zjawisko,że kallus ma chlorofil,taki na zdrewniałej gałązce.Praktycznego znaczenia dla mnie to
nie ma,przecież nie będę go przesadzał. Jasny zanika,zielony jeszcze żyje.

[damek1718]

To normalne , ze kalus powstaje w miejscu zranienia tkanki. Nie ma znaczenia czy na górze czy na dole. Mało tego, może powstawać z rejonów aktywnych morfogenetycznie, np. z przetchlinek na pędzie czyli po środku pędu :)skoro wytworzył się kalus tzn, ze pęd żyje, jeśli zielonkawy kalus, komórki posiadają dodatkowo funkcję asymilacyjną i przekształcają się w tkankę dlatego ten zielony żyje.

[mirzan]

Tak wyglądają gałązki z kallusem.Jasny brązowieje i zanika.Zielony trzyma się.

[ERNRUD]

I jak to dalej wyglądało?